細胞培養的開始,就是復蘇細胞。如何有條不紊地讓細胞從沉睡中蘇醒?今天就來給大家總結幾個實用小技巧,快點來get!
細胞復蘇流程:
1、將凍存的細胞從液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中進行融化,輕柔晃動,加速融化,直到小瓶中只剩下一小塊冰,時長應控制在1min中;
2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉移無菌操作臺中,打開瓶蓋前,用酒精燈火焰對瓶口進行消毒;
3、將預加熱的新鮮*培養基滴入小瓶中。緩慢用移液槍吸取瓶中液體至15ml離心管中,加入適量濃度和體積的*培養基,輕柔混合均勻;
4、200 × g左右細胞懸浮液離心5-10分鐘。實際的離心速度和持續時間因細胞類型而異。棄掉上清,加入新鮮*培養基重懸細胞,并將其轉移到適當的培養容器和推薦的培養環境中。
細胞解凍流程圖
注意事項:
1、液氮溫度低,小心低溫對人造成的傷害,在液相中儲存的冷凍瓶在解凍時存在爆炸的風險,因此,取出凍存管的時候,要做好個人防護。
2、通常細胞集中儲藏在液氮中,取出時應迅速,避免溫差對其他凍存細胞造成影響。
3、復蘇細胞的核心技術,簡而言之就是快融,將在37°C水浴中快速解凍冷凍細胞(< 1分鐘。
4、解凍時,凍存管先放入無菌一次性PE手套中,再放入水中融化,避免污染也方便操作。
5、用預熱過的培養基慢慢稀釋解凍的細胞。
6、解凍細胞后,在培養皿中培養時,應盡量維持高密度,以提高細胞存活率。
7、注意無菌操作,避免細胞發生污染。
細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優質血清!
Ausbian進口特級胎牛血清,有以下優點,可以較大程度地幫助實驗者提高細胞實驗成功率:
1. 精選內毒素更低批次(≤3EU/ml),原zhuang進口。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。
實驗室有些細胞,需要長期培養、長期凍存,或者經常復蘇、經常培養的,血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。
2. 新批次在試用前,提供試用服務,養細胞更放心。
3. 每個批次產量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優先鎖定,保證大多數項目兩年不需換批次,細胞試驗數據穩定。
4. 每年按廠家生產順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩定。
5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多免費延伸性技術幫助)。
6. 針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。
7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發貨。
8. Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復凍融。
9. 免費真品保障,每個血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標簽,Ausbian品牌真品保護,逢假必究,為實驗室做好售后保障。
10. 免費無憂售后,所有實驗室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計算,一年之內,血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。
11. 免費專業幫助,匯集近二十年,千萬個血清用戶細胞培養經驗,為各種細胞培養提供問題梳理分析,解決方案參考。
12. Ausbian品牌擁有全系列血清產品線:
特級胎牛血清、細胞治療專用胎牛血清(貨號:WS500T(紅點)),透析胎牛血清 (貨號:VS500TZ )等多系列產品,服務更專業更精準。