腫瘤細胞在體外不易生長,那我們該如何培養好腫瘤細胞呢?
取材、成纖維細胞排除,培養液和培養底物。
(1)取材:盡量避免取退變組織,癌性轉移淋巴結、胸腹水是好的培養材料,組織盡快培養,如不能立即培養,可貯存于4℃,不宜超過24小時。
(2)培養基的選擇:
RPMI1640、DMEM、mc-coy5A
有些腫瘤細胞需要生長因子,如乳腺癌細胞。
注意:含有血清和相關生長因子更易培養成功。
(3)成纖維細胞的排除
成纖維細胞>腫瘤細胞的生長。
機械刮除法:
標記腫瘤細胞生長的范圍(畫圈),刮除直至*刮除掉為止 。
反復貼壁法:
不加血清培養液,把含有兩類細胞的懸液反復貼壁使兩類細胞相互分離。
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