胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是在生物醫學研究和細胞培養中廣泛使用的重要生物制品,它含有豐富的生長因子、蛋白質和其他生物分子,對細胞生長和增殖起著至關重要的作用。制備胎牛血清是一個復雜的過程,通常由專業的生物制品公司進行,以確保其質量和純度。在本文中,我們將介紹一般的胎牛血清制備過程的主要步驟。
步驟1:采集胎牛血液
制備胎牛血清的第一步是采集胎牛的血液。這需要在專業場所進行,確保采集的胎牛來自健康且受監控的牧場。采集血液需要遵循倫理和動物福利的法規和標準。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。
步驟2:血液分離
采集的胎牛血液會經過離心分離,將血漿與血細胞分開。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細胞體外生長和繁殖的營養成分,如蛋白質、生長因子和激素。
步驟3:過濾和清理
分離后的血漿會經過過濾等步驟,以去除殘留的細胞碎片和顆粒物。這有助于提高血清的質量和純度,確保它不含有微生物或其他污染物。
步驟4:滅菌
胎牛血清需要進行滅菌處理,以確保其中不含有微生物污染。常見的滅菌方法包括過濾、輻照(細胞治療專用)等,這些方法可以有效地殺滅細菌、病毒和其他微生物。
以Ausbian進口特級胎牛血清為例:將經過初步檢測合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無菌過濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質量上基本無差異。不同廠家一個批次產量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗的穩定和連續的可參照性。
步驟5:質量控制
制備后的胎牛血清通常會經過一系列的質量控制測試,包括檢測其對細胞培養的兼容性、生長因子和激素水平,以確保其質量符合要求。這些測試有助于驗證血清的質量和生物活性。
步驟6:分裝和儲存
制備后的胎牛血清會被分裝到小瓶或小管中,并嚴格冷凍保存。這有助于防止血清中的成分降解或受到污染。儲存溫度通常為零下20攝氏度或更低,以確保血清的長期保存穩定性。
總之,制備胎牛血清是一個復雜的過程,需要專業的設備和技術。在實驗室中,研究人員通常會從可靠的商業供應商購買胎牛血清,這些供應商生產的胎牛血清符合嚴格的質量標準,可以用于細胞培養和生物醫學研究。正確使用和存儲胎牛血清是確保實驗成功的關鍵,因此研究人員應遵循供應商的建議和操作規程,以充分利用這一重要的生物制品。