進口彎曲菌顯色培養(yǎng)基蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發(fā)酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非弧菌細菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;混合色素與副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌所對應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產(chǎn)生品紅色菌落(副溶血性弧菌)和綠-藍綠色的菌落(霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌)。
進口彎曲菌顯色培養(yǎng)基的使用方法
1、取瓶內(nèi)弧菌顯色培養(yǎng)基干粉71.3克,用1000ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解,不需高壓滅菌,冷至約50℃,傾注滅菌平皿。
2、以無菌操作取檢樣25g(mL),加入3%氯化鈉堿性蛋白胨水225mL,用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8000r/min均質(zhì)1min,或拍擊式均質(zhì)器拍擊2min,或用Pulsifier脈沖式樣品處理器均質(zhì)30秒,制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質(zhì)器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然后放在500mL的滅菌容器內(nèi),加225mL3%氯化鈉堿性蛋白胨水,并充分振蕩。
3、增菌:將上述1:10稀釋液于36±1℃培養(yǎng)8~18h。
4、分離:在增菌液中用接種環(huán)取一環(huán),于弧菌顯色平板上劃線分離,于36±1℃培養(yǎng)18~24h。5、通過驗證試驗進一步確認假定性副溶血性弧菌和其他弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色、生化鑒定等。進一步的試驗。
進口彎曲菌顯色培養(yǎng)基的注意事項
1.稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。
2.干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。
3.自制平板時需注意培養(yǎng)基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基,平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。
4.即用型成品平板應(yīng)該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產(chǎn)品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水,屬于正常現(xiàn)象。使用前應(yīng)平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預(yù)干燥。