說起細(xì)胞培養(yǎng)用的血清,大多數(shù)人都會(huì)想到胎牛血清、新生牛血清,對(duì)于馬血清卻知之甚少。今天就給大家介紹一下血清中“低調(diào)的高手"——馬血清。
一、馬血清作用
細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)的馬血清,經(jīng)過多次過濾,去除了許多大分子蛋白,但保留了血清中促細(xì)胞生長(zhǎng)的活性因子,表現(xiàn)出與胎牛血清和牛血清的類似的特性,因而能用于細(xì)胞培養(yǎng)。
馬血清可以刺激成纖維細(xì)胞分化,以及細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 、細(xì)胞因子的合成。另外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞、誘導(dǎo)生成樹突狀細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)均可用馬血清替代胎牛血清。
因此,馬血清通常適用于那些研究有絲分裂后,細(xì)胞關(guān)于生長(zhǎng)因子和激素等問題的實(shí)驗(yàn)。或許,我們可以這樣說,從現(xiàn)有研究來看,馬血清更適合用來研究特定種類細(xì)胞的分化。
實(shí)際實(shí)驗(yàn)應(yīng)用方面:馬血清已被用作腦皮質(zhì)神經(jīng)元-膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)的一種必添加物;大鼠的 PC12 細(xì)胞,在培養(yǎng)過程中,也需要在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加馬血清作為補(bǔ)充劑。
1. 馬血清可用于細(xì)胞培養(yǎng)和干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化,例如:
(1)RPMI-1640培養(yǎng)液加馬血清培養(yǎng)臍帶血單個(gè)核細(xì)胞。
(參考文獻(xiàn):李春莉, 王建偉, 姜蓉, et al. 人參總皂苷誘導(dǎo)紅系血細(xì)胞增殖的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[J]. 中國(guó)組織工程研究, 2009(23):4568-4572.)
(2)原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞。有人用含10%馬血清的DMEM,分離培養(yǎng)BALB/c小鼠原代腦神經(jīng)細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)和添加2%神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)劑B27的Neurobasal培養(yǎng)基相比,含10%馬血清的DMEM培養(yǎng)基更節(jié)省成本,方便廉價(jià)。
(參考文獻(xiàn):李丹, 呂耀中, 王微,等. 兩種培養(yǎng)基分離培養(yǎng)BALB/c小鼠原代神經(jīng)細(xì)胞方法的比較[C]// 中國(guó)北方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技年會(huì). 遼寧省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì), 2015.)
(3)誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞向成肌細(xì)胞分化
(文獻(xiàn)來源:劉杰,傅強(qiáng).馬血清在脂肪干細(xì)胞成肌誘導(dǎo)中的作用[J].中國(guó)組織工程研究, 15(14))
(4)培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細(xì)胞。與胎牛血清相比,馬血清對(duì)小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的促增殖作用更好。
(文獻(xiàn)來源:王改琴. 當(dāng)歸多糖對(duì)小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞黏附分子表達(dá)及其黏附功能的影響[D]. 學(xué)位論文.重慶醫(yī)科大學(xué), 2008.)
(5)添加20%馬血清的L-DMEM培養(yǎng)液可誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞。
(文獻(xiàn)來源:趙文靜,陳亞潔,劉薇.人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志.2006.16(18):2744-2747)
2. 馬血清添加到微生物培養(yǎng)基中,可用于培養(yǎng)微生物,如:
(1)馬血清添加到培養(yǎng)基中用于支原體的培養(yǎng)。在《獸藥典》中,含馬血清的支原體培養(yǎng)基被用于獸用疫苗的支原體檢查。用KM2培養(yǎng)基(含馬血清)還可培養(yǎng)豬肺炎支原體。
(文獻(xiàn)來源:胡茂志 焦新安,等.豬肺炎霉形體單克隆抗體的制備與鑒定.《中國(guó)獸醫(yī)科技》 2004年12期)
(2)馬血清加入到固體和液體培養(yǎng)基中,可用于培養(yǎng)幽門螺桿菌。并且,和羊血清和牛血清比較,添加馬血清的培養(yǎng)基更易于分裝和保存。
(文獻(xiàn)來源:劉琳娜, 丁士剛, 張靜,等. 幾種培養(yǎng)幽門螺桿菌方法的比較[J]. 胃腸病學(xué), 2012, 017(004):240-241.)
3. 馬血清及激素可共同誘導(dǎo)建立家兔股骨頭缺血壞死的模型。
(文獻(xiàn)來源:洪嵩, 張?zhí)旌? 非創(chuàng)傷性股骨頭壞死模型的血液流變學(xué)及脂質(zhì)代謝[C]// 2009第一屆貴州骨科論壇.)
二、注意事項(xiàng)
與胎牛血清一樣,馬血清在使用過程中也應(yīng)注意幾個(gè)原則:
1、避免反復(fù)凍融;
2、三步法解凍,及時(shí)分裝;
3、配制好的*培養(yǎng)基在4℃儲(chǔ)存不要超過7天。
還有一個(gè)大家比較關(guān)心的問題,馬血清是否需要滅活?
我們都知道,胎牛血清由于特殊的采血時(shí)間(5-8月胎齡),牛胚胎體內(nèi)還沒有形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因而不需要采用熱滅活的手段對(duì)補(bǔ)體進(jìn)行滅活。
而馬血清,在沒有特殊說明的情況下,一般采自成年馬匹。作為脊椎動(dòng)物,成年馬也擁有完整的補(bǔ)體系統(tǒng)。
因而,如果所進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中,涉及補(bǔ)體相關(guān)內(nèi)容,建議大家在使用前對(duì)馬血清進(jìn)行熱滅活,也可以直接購(gòu)買商品化的滅活馬血清。一些比較成功的實(shí)驗(yàn)案例中,所用到的馬血清,也是經(jīng)過熱滅活的。
Ausbian馬血清為細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)。它來自健康馬血液,為封閉系統(tǒng)內(nèi)無菌采血過濾而成,為淡黃色澄清液體,超低內(nèi)毒素,無溶血,無異物,無細(xì)菌、真菌、支原體、噬菌體等。
產(chǎn)品描述
1、每個(gè)批次均具有完整的檢測(cè)報(bào)告,其中含有下列檢測(cè):
1)理化檢查
包括外觀、pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、內(nèi)毒素、蛋白顆粒度等
2)無菌檢查
含細(xì)菌真菌檢查、支原體檢查、噬菌體檢查,確保不含這些外源因子。
3)病毒檢查
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)為陰性。
2、極低內(nèi)毒素。
3、提供試用,養(yǎng)細(xì)胞更安心。